Регенеративная терапия аутологичными фибробластами

• Отделение эстетической медицины
  Отделение эстетической медицины »
• Инъекционная косметология

  Инъекционная косметология »

• Услуги

  Услуги »

• Регенеративная терапия аутологичными фибробластами

Регенеративная (или восстановительная) терапия аутологичными фибробластами – это удивительная процедура, которая в 2010 году перешла из области эксперимента в сферу доказательной медицины.

Регенеративная терапия — это клеточная терапия, которая восстанавливает утраченные функции организма с помощью трансплантации функционально активных клеток. Имплантированные клетки выделяют биологически активные субстанции, которые оказывают лечебный и восстановительный эффект.

Для лечения используются собственные, культивированные фибробласты пациента.

Этот уникальный метод получил мировое признание, как эффективный и безопасный метод. Именно поэтому регенеративная терапия внедрена в повседневную практику Клиники «РАМИ».

Для кого эта методика?

Трудно найти человека в зрелом возрасте, который был бы доволен состоянием своей кожи. С годами количество активных фибробластов уменьшается, это приводит к появлению морщин, опущению тканей век или скул.

Современная медицина позволяет эффективно восполнить дефицит живых клеток кожи. Именно для этого предназначена регенеративная терапия аутологичными фибробластами, которая в равной степени эффективна как для женщин, так и для мужчин.

Кроме коррекции возрастных изменений, терапия аутологичными фибробластами показана для лечения рубцов постакне, стрий, а также в ходе предоперационной подготовки и послеоперационной реабилитации в пластической хирургии.

Кто проводит исследования и разрабатывает методику СПРС?

Такого рода технологиями в России занимается ОАО «ИСКЧ». Та самая технология, на которой основана методика омоложения фибробластами (СПРС методика), запатентована и допущена к использованию Федеральной службой по надзору в сфере здравоохранения и социального развития.

Институт имеет полный пакет лицензий и непрерывно занимается разработками в области клеточных технологий с 2003 года. В данный момент ИСКЧ признан интернациональной биотехнологической компанией с множеством современных процессинговых лабораторий и офисов в Москве, Санкт-Петербурге, Германии и Украине. Кроме лабораторий Институт владеет хранилищами клеточного материала и регулярно выпускает научное издание «Клеточная Трансплантология и Тканевая Инженерия».

Уникальность регенеративной терапии

Аутологичные дермальные фибробласты — это основные клетки соединительной ткани человека, которые формируют внеклеточный матрикс. Они играют ведущую роль в физиологии кожи: регулируют все обменные процессы, стимулируют обновление клеток, учувствуют в процессах заживления повреждений.

Одна из основных причин старения кожи — это снижение активности фибробластов. Они замедляют синтез межклеточного пространства, в результате уменьшается содержание влаги, кожа увядает, появляются морщины.

Благодаря введению аутологичных фибробластов в тканях запускаются собственные обменные процессы, происходит естественное восстановление и омоложение кожи.

Технология регенеративной терапии абсолютно безопасна, не вызывает аллергических реакций и отторжений, так как используются только натуральные компоненты — собственные клетки пациента.

Клеточная судьба, и как ее изменить

Всё разнообразие типов клеток в нормальном развитии — нейроны, клетки кожи, крови, печени и другие — формируется в результате деления и дифференцировки одной клетки — зиготы. Зигота образуется при слиянии гамет — ооцита и сперматозоида. Затем в результате клеточного деления формируется группа клеток — морула. Далее образуется полость — бластоцель; эта стадия эмбрионального развития называется бластоцистой. Наружные клетки — трофобласт — будут участвовать в имплантации и формировании плаценты, а из внутренней клеточной массы разовьются все типы клеток эмбриона. Эмбриональное развитие можно представить как дерево, в основе которого лежит одна клетка (зигота), а ветви, отходящие от ствола, символизируют последовательную дифференцировку клеток. Аналогия со стволом удобна еще и тем, что из клеток внутренней клеточной массы получают эмбриональные стволовые (ЭС) клетки, о которых пойдет речь дальше. Клетки внутренней клеточной массы — недифференцированные: они способны стать клетками любого типа. Каждое ветвление дерева — выбор судьбы в процессе дифференцировки, специализация клеток и сужение спектра дифференцировки. Сначала происходит разделение на три зародышевых листка — эндодерму, мезодерму и эктодерму. Можно дополнительно выделить зародышевый путь, будущие гаметы. Очень схематично дальнейшее развитие можно представить как формирование клеток таких органов как почки, лёгкие, желудок из энтодермы; мышц, сердца, селезенки, крови — из мезодермы; нервной системы и эпидермиса — из эктодермы. Способность к делению и дифференцировке в клетки — производные трех зародышевых листков — называется плюрипотентностью. Программа развития осуществляется путем последовательной активации различных групп транскрипционных факторов, которые регулируют экспрессию множества генов. На экспрессию генов влияют как внутренние факторы, так и внешние сигналы, например получаемые от окружающих клеток. Поддержание жизнедеятельности органов и тканей осуществляют взрослые стволовые клетки. Различные типы стволовых клеток уже были рассмотрены на «биомолекуле»: «Ствол и ветки: стволовые клетки» [1].

В экспериментальных системах и в некоторых случаях в нормальном развитии возможно изменение судьбы клеток (рис. 1). Если дифференцировка — превращение недифференцированной клетки в дифференцированную, то обратный процесс называется дедифференцировкой. Превращение одного предшественника клеток в другой — трансдетерминация. Например, в процессе кроветворения гемопоэтические стволовые клетки дифференцируются в предшественников лимфоидного ряда (лимфоцитов и др.) и миелоидного ряда (гранулоциты, макрофаги, эритроциты и др.). Оказалось, что в экспериментальной системе можно вызвать трансдетерминацию — с помощью экспрессии транскрипционных факторов изменить судьбы предшественников миелоидного ряда так, что они дифференцируются в предшественников гранулоцитов и макрофагов, или, в другом эксперименте, в предшественники эритроцитов [2]. И, наконец, недавно была показана прямая дифференцировка — эмбриональные стволовые клетки можно напрямую дифференцировать в нейроны в результате экспрессии определенных транскрипционных факторов. Прямой такая дифференцировка названа из-за того, что обязательные в нормальном развитии стадии дифференцировки в этом случае отсутствуют. Наконец, превращение дифференцированной клетки одного типа в другой без прохождения стадий дедифференцировки — трансдифференцировка.

Рисунок 1. Различные пути изменения судьбы клетки. Нормальное развитие — дифференцировка тотипотентной зиготы в различные типы клеток с постепенным сужением потенциала к дифференцировке. В эксперименте можно изменить судьбу клетки — вызвать дедифференцировку, трансдетерминацию или прямую дифференцировку.

Все вышеописанные способы изменения судьбы клетки потенциально пригодны для использования в клеточной терапии. Ниже будут рассмотрены возможности применения этих подходов с акцентом на получении нейральных клеток и использовании относительно нового направления в исследованиях, трансдифференцировки.

Эффективность метода регенеративной терапии

Эффективность методики доказана многочисленными клиническими исследованиями в США, Европе и России.

Специалисты Уральской государственной медицинской академии и ГУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий» на протяжении двух лет наблюдали за 45 пациентам в возрасте 43 — 60 лет, которым трансплантировали аутологичные фибробласты.

В результате было выявлено, что после процедуры у пациентов исчезли мелкие и скорректировались глубокие морщины, повысился тургор и эластичность кожи, увеличилась её толщина. Эффект носит нарастающий характер, достигает максимума через 15 месяцев (после введения клеток) и сохраняется на протяжении не менее двух лет. Побочных эффектов после процедуры за период наблюдения не выявлено.

В 2012 г. в многопрофильной клинике «РАМИ» современная технология безоперационного омоложения кожи на основе клеточной терапии была внедрена в повседневную практику.

Этому предшествовала многоплановая работа сотрудников нашей клиники:

• изучение научных публикаций об использовании клеточных технологий в косметологии, посещение международных форумов;
• участие в экспериментальных работах по культивации клеток, проведение консультаций с зарубежными и российскими коллегами;
• поиск партнеров, имеющих лицензию на проведение биотехнологических работ;
• формирование соответствующей материально-технической базы и кадрового ресурса специалистов.

Как проходит омоложение фибробластами?

Работа по данной методике подразумевает 2 процедуры за 1 курс, выполняемые с интервалом в 1-1,5 месяца. Во время курса омоложения фибробластами корректируется лицо, зона декольте, руки и шея. Препарат вводят самыми тонкими инсулиновыми иглами. За час до начала процедуры необходимый участок смазывается анестезирующим кремом, позволяющим снизить болезненность процесса.

После того, как средство окажется в дерме, число активных фибробластов возрастает: они принимаются синтезировать коллаген с прежней скоростью, и естественный процесс регенерации возобновляется. Результат лечения — заметное омоложение, уменьшение количества и степени выраженности морщин, повышение тургора и увлажненности, значительное замедление процесса старения.

Как проходит лечение методом регенеративной терапии

Регенеративная терапия аутологичными фибробластами предусматривает 2 этапа: клинический и лабораторный (биотехнологический).

Клинический этап

Проходит в многопрофильной клинике «РАМИ».

Сначала проводится комплексное обследование пациента, устанавливаются показания к применению данного метода лечения, выявляются возможные противопоказания, определяется оптимальная схема введения препарата.

Затем специалисты клиники «РАМИ» осуществляют забор лоскута кожи из заушной области размером 0,6*0,6 см. Полученный биоптат транспортируется в специализированную лабораторию для обработки клеток (культивации).

Лабораторный этап

Проводится в специализированном учреждении, который имеет лицензию на проведение биотехнологических работ, выделение, культивирование и хранение клеточных культур. Полученная в лаборатории культура фибробластов тестируется на стабильность, онкологическую и инфекционную безопасность. Каждому препарату, который содержит терапевтическую дозу клеток, выдаётся соответствующий паспорт.

Для внутрикожного введения в проблемную зону пациента требуется определённая терапевтическая доза фибробластов (не менее 1 млн. клеток), которая определяется врачом.

Забор лоскута кожи, его транспортировка, интрадермальное введение клеток проводится в условиях максимальной стерильности.

Время для культивирования клеток и формирования культуры фибробластов в специализированной лаборатории составляет 25 — 29 дней. Полученная культура фибробластов замораживается в жидком азоте и хранится необходимое время с соблюдением всех требований.

Далее из полученной культуры приготавливается препарат живых фибробластов в виде суспензии, в 1-ом мл которой содержится не менее 1 млн. функционирующих фибробластов. Время, требуемое для подготовки препарата, составляет 5 — 7 дней.

Омоложение кожи собственными фибробластами.

Суть SPRS терапии® заключается в том, что у пациента из-за уха (там кожа меньше всего повреждается УФ-лучами) берут кусочек кожи диаметром 4 мм и из него получают культуру фибробластов. В коже каждого человека, независимо от возраста, присутствуют клетки-предшественники фибробластов. В культуре они способны образовывать колонии — клоны, состоящие из десятков и даже тысяч фибробластов, развившиеся из одной клетки-предшественницы. Это означает, что у человека любого возраста из небольшого фрагмента кожи можно получить необходимое для проведения терапии количество фибробластов. Мы не преувеличиваем, когда говорим о «любом возрасте»: в коже даже 95-летнего человека присутствует до 14% активных фибробластов!

Как оказалось, при культивировании клеток можно получить очень интересную индивидуальную характеристику кожи, на основании которой можно рассчитать величину регенераторного потенциала фибробластов (то есть, их способности поддерживать саморегуляцию ткани и восстанавливать ее при повреждении), на основании чего затем – сделать заключение о регенераторном потенциале кожи в целом, и, значит, ее способности к самовосстановлению. Величина этого потенциала индивидуальна для каждого человека, она не зависит от его возраста. Учитывая этот показатель, можно для каждого пациента разработать свою индивидуальную программу обновления и восстановления кожи (так называемые «Паспорт кожи®» и «SPRS-программа»).

Для чего это нужно? Всем знакома такая ситуация: два пациента одного и того же возраста проходят одни и те же процедуры, потом один в полном восторге, а другой жалуется, что толку никакого. «Паспорт кожи» помогает прогнозировать результат, выяснить, кому легко будет получить отличный эффект, а кому необходимо провести подготовительные процедуры. В этом и заключается суть индивидуальной SPRS-программы.

Процесс введения клеток в проблемную зону

График введения клеток в проблемную зону кожи зависит от:

• времени, необходимого для получения культуры клеток;
• терапевтической дозы препарата живых клеток;
• индивидуальных особенностей кожи пациента;
• от выбора оптимальной схемы терапии, рекомендованной врачом.

Зона введения клеток

Зона, в которую осуществляется внутрикожное введение фибробластов определяется врачом и пациентом совместно. Как правило, выбираются проблемные области лица — вокруг глаз, носогубные складки. Препарат клеток также может вводиться в область шеи, декольте.

Особенный интерес представляет использование аутологичных фибробластов для омоложения кожи тыльной поверхности кистей рук. Аутологичные фибробласты могут вводиться в область рубцов, стрий, морщин.

В зависимости от глубины и выраженности изменений кожи используется папульный или туннельный способ введения препарата клеток.

Процедура введения живых клеток

• процедура проводится под местной анестезией. В проблемную зону пациента тоненькой иголочкой врач вводит препарат, обогащённый фибробластами;
• в зависимости от проблемы, может потребоваться несколько сеансов;
• процедура проводится под местной анестезией. Тоненькой иголочкой врач вводит препарат, обогащённый фибробластами, в проблемную зону пациента;
• после процедуры может возникнуть лёгкое покраснение и отёчность, которое исчезнет в течение 2 — 3 часов.

При введении в кожу активных фибробластов запускаются естественные процессы восстановления дермы. Эффект от процедуры начинает проявляться уже через 6 — 8 часов после сеанса и со временем нарастает. Спустя 8 — 9 месяцев после курса лечения наблюдается стойкий положительный результат.

Результат после регенеративной терапии

После введения культивированных фибробластов, в обрабатываемой зоне увеличивается количество клеток дермы, усиливается синтез собственного коллагена, восстанавливается микроциркуляция, стимулируются обменные процессы и кровообращение.

Высокая эффективность метода обусловлена способностью имплантированных живых собственных клеток в течение длительного времени (8-9 месяцев) продуцировать биологически активные вещества, характерные для молодой кожи: повышается её прочность и эластичность, происходит эффект лифтинга.

Результат имплантации живых клеток: исчезают морщины, рубцы, стрии. Дерма полностью обновляется, восстанавливается здоровый цвет кожи, повышается ее тургор, кожа становится бархатистой, исчезает сухость и шелушение.

Насколько безопасна технология омоложения фибробластами?

Технология омоложения фибробластами безопасна на 100%, что подтверждают результаты огромного количества доклинических и клинических исследований (российских и иностранных). Все они говорят о высокой эффективности и безопасности использования культивированных собственных клеток дермы для замедления процессов старения. Посмотреть более подробную информацию об этих исследованиях можно здесь. Стоит подчеркнуть, что каждый образец взятого у пациента материала обязательно проверяется на биобезопасность, чтобы исключить присутствие ряда вирусов и бактерий.

Отличие от других методик

Главное отличие от других методик — это используемый препарат. Восстановление кожи пациента происходит за счёт собственных клеток, которые культивируются в лабораторных условиях.

В ходе процедуры на кожу пересаживаются живые клетки, которые резко ускоряют механизм регенерации кожи благодаря продукции ими ростовых факторов и компонентов каркаса дермы. Метод не только корректирует видимые дефекты кожи, но и восстанавливает ее на уровне микротекстуры.

Современные косметологические методики (антиоксиданты, гидранты, эластостимуляторы, биостимуляторы, капилляропротекторы и др.) оказывают определенный омолаживающий эффект, однако принцип действия построен на коррекции последствий старения. Заместительная клеточная терапия решает проблему увядания кожи на принципиально другом уровне: процесс снижения запасов собственных клеток кожи останавливается. Это означает, что процесс старения в обрабатываемой зоне не просто останавливается, а даже поворачивается вспять.

Регенеративная терапия лечит возрастные изменения кожи, когда остальные методы лишь корректируют их последствия.

Эти ленивые фибробласты

Теперь смотрим отчеты ученых: после 40 лет в организме женщины происходит снижение выработки гиалуроновой кислоты. С каждым годом ее становится на 5% меньше. Значит, гелевый «наполнитель» слабеет, количество коллагеновых волокон сокращается. Сами «пружины» становятся толще и жестче. И между «пружинами» под воздействием внешних сил образуются складки – морщины.

А все почему? Потому что фибробласты (клетки, живущие в гиподерме) синтезируют все меньше гиалуроновой кислоты. К сожалению, происходит это не только в силу возраста. Процесс старения запрограммирован в нас генетически: кто-то сохраняет молодость кожи до 50 лет, а кто-то уже в 30 выглядит не лучшим образом.

При подготовке материала использованы следующие источники:

• «30-летний опыт разработки и применения клеточных технологий в клинической практике». В.П. Туманов, Д.А. Жакота, Н.С, Корчагина. Научно-практический журнал «Пластическая хирургия и косметология», 2012 (3), Москва, Россия.
• Исаев АА, Приходько АВ, Зорин ВЛ и др. Медицинская технология «Забор, транспортировка, выделение, культивирование, криоконсервирование, хранение и использование аутологичных фибробластов для коррекции возрастных и рубцовых изменений кожи». ФС№2009/308 от 21 июля 2010 г., Москва, Россия.
• «Применение аутологичных дермальных фибробластов для коррекции возрастных изменений кожи лица. Результаты годичных исследований.» Авторы: В. Зорин, А. Зорина,В. Черкасов и др. Журнал «Эстетическая медицина», том XI №2, 2012 г., Москва, Россия.
• «Качественная и количественная оценка состояния кожи лица после применения аутологичных дермальных фибробластов.» Авторы: В. Л. Зорин, А. И. Зорина, В. Р. Черкасов, П. Б. и др. Журнал «Вестник Эстетической Медицины», том 10, №2, 2011 г., Москва, Россия.

Возможно Вам будет полезно:

• Посттравматическая, послеожоговая регенерация кожного покрова

Если Вы действительно ищете своего доктора…

В этой статье поговорим о функции дермальных фибробластов в коже, процессе их старения, а также о методе обновления и стимуляции регенерации кожи путём введения аутологичных фибробластов.

Введение

Роль дермальных фибробластов (ДФ) в обновлении кожи трудно переоценить, поскольку они являются основным клеточным компонентом соединительнотканной основы кожи, обеспечивающим её гомеостаз и морфофункциональную организацию. Очевидна актуальность этой темы для регенеративной (репаративной) косметологии, задача которой — омоложение кожи путём активации естественных процессов её восстановления.

Функции дермальных фибробластов

Из всех функций ДФ наибольшее внимание специалистов в области эстетической медицины и дерматологии сосредоточено на продуцировании этими клетками компонентов внеклеточного матрикса (ВКМ) дермы: коллагена, эластина, протеогликанов, особенно гиалуроновой кислоты (ГК), и структурных гликопротеинов.

Повышенный интерес именно к этой функции ДФ понятен: названные компоненты ВКМ формируют и поддерживают структуру кожи, обеспечивая её упругость и прочность. Причём ДФ не только синтезируют эти вещества, но и обеспечивают их катаболизм путём прямого фагоцитоза «отработанных» фрагментов фибрилл коллагена и эластина, секреции коллагеназы, гиалуронидазы и прочих ферментов.

Резидентные клетки ткани — образующиеся и постоянно пребывающие в этой ткани.

Другая, и не менее значимая для кожи, активность ДФ оставалась до недавнего времени несколько на обочине поля зрения врачей-практиков, однако сегодня она тоже становится объектом пристального внимания клиницистов. Речь идёт о целом ряде важнейших функций фибробластов. Так, продуцируя коллаген IV типа и ламинин, они влияют на формирование базальной мембраны. Фибробласты формируют строму, которая не только служит каркасом (опорой) для эпителия, но и регулирует структурную организацию и функционирование эпителиальных клеток. Они вырабатывают и выделяют факторы клеточного роста (KGF-1 — фактор роста кератиноцитов, GM–CSF — гранулоцитарно-макрафагальный колониестимулирующий фактор роста), иммунорегуляторные интерлейкины IL-6, IL-8. За счёт секреции факторов роста и интерлейкинов и непосредственного взаимодействия с эпителиальными клетками ДФ играют ключевую роль в регуляции эпидермального морфогенеза. Их паракринная активность служит основой для поддержания гомеостаза стволовых кератиноцитов.

Дермальные фибробласты секретируют факторы, влияющие на дифференцировку лимфоцитов, и факторы, регулирующие численность, миграцию и функции гранулоцитов и макрофагов, обеспечивая тем самым поддержание иммунитета кожи. Вырабатывая множество проангиогенных факторов, которые индуцируют дифференцировку и миграцию эндотелиальных клеток, ДФ способствуют образованию и стабилизации сосудов.

Они принимают участие в процессах нейроэндокринной регуляции кожи. Синтезируют биологически активные пептиды: гормоны, биогенные амины, нейропептиды и нейротрансмиттеры, идентичные таковым в центральной нервной и эндокринной системах, экспрессируют рецепторы андрогенов и эстрогенов, посредством которых осуществляется влияние этих гормонов на кожу человека.

Фибробласты, взаимодействуя с различными резидентными клетками: эпидермальными, эндотелиальными, нервными, жировыми, гемопоэтическими, участвуют практически во всех кожных процессах, в том числе — физиопатологических. Таким образом, ДФ представляют собой центральное звено в биологии кожи: они поддерживают не только гомеостаз ВКМ дермы, обеспечивая её ремоделирование и обновление, но и физиологическое состояние других слоёв и структур кожи.

Рис. 1. Взаиморасположение фибробластов и коллагеновых волокон: a — в коже молодых людей (18–29 лет); b — в коже людей старшего возраста (старше 80 лет) (Varani J., et al. 2006, с изм.)

Инволюция дермальных фибробластов

По мере старения организма растёт число ДФ, в которых происходят возрастзависимые изменения, связанные преимущественно с непрерывным накоплением повреждений. Такие ДФ обозначают как «стареющие», или сенесцентные фибробласты (ДФст). Снижается их способность к ремоделированию и организации ВКМ, так как уменьшается синтез и секреция ими основных компонентов ВКМ. Нарушается эпидермальный гомеостаз из‑за негативных изменений в паракринных механизмах, связывающих эпидермис и папиллярный слой дермы. В популяции ДФст происходит увеличение секреции богатого цистеином ангиогенного индуктора — белка 61 (CYR61, или CCN1), стимулирующего продукцию провоспалительных цитокинов и матриксных металлопротеиназ (MMPs). CCN1 и MMPs поддерживают старение клетки путём негативной регуляции гомеостаза коллагена и увеличения его деградации.

Постепенно баланс между синтезом и деградацией коллагена нарушается в пользу последней. Повреждённый коллагеновый каркас ВКМ уже не может удерживать фибробласты в растянутом состоянии, свойственном молодым клеткам. Происходит своего рода коллапс фибробластов, что приводит к нарушению их функций. В процессе инволюции уменьшается численность фибробластов. Снижается и биосинтетическая активность этих клеток, нарушается баланс между синтезом и деградацией ВКМ дермы. В среднем, у пожилых / старых людей, по сравнению с молодыми, общее количество ДФ меньше на 35 %, продукция коллагена в коже снижена на 75 %, причём содержание коллагена уменьшается приблизительно на 1 % в год.

Все сенесцентные изменения в популяции ДФ приводят к постепенному и значительному снижению способности кожи к регенерации и обновлению. Как при этом меняется статус кожи? Уменьшается её толщина, снижается упругость и эластичность, появляются морщины, заломы, птоз тканей — кожа стареет.

Очевидно, что именно ДФ должны быть основной «мишенью» омолаживающих кожу косметологических методов. Так оно и есть: все современные терапевтические воздействия в целях коррекции возрастных изменений кожи — инъекционные, включая PRP-терапию, аппаратные (лазерные, радиочастотные, ультразвуковые) — направлены прежде всего на стимуляцию функциональной активности ДФ, как пролиферативной, так и биосинтетической. Особое место в этом ряду занимает применение аутологичных (собственных) дермальных фибробластов, или SPRS-терапия.

SPRS-терапия как метод оздоровления и обновления кожи

SPRS-терапия (SPRS — от англ. Service for Personal Regeneration of Skin — персонифицированный комплекс лечебно-диагностических процедур для восстановления кожи) — метод регенеративной медицины (РУ ФС №2009 / 308 от 21.07.2010). Его применение позволяет восполнить уменьшившуюся с возрастом популяцию ДФ за счёт введенных в кожу специализированных молодых и функционально активных клеток. Трансплантируются собственные фибробласты кожи пациента, поэтому они полноценно приживаются, интегрируют с резидентной клеточной популяцией и живут «по законам» дермы.

После трансплантации их биосинтетическая активность сохраняется не менее года, причём без какой‑либо дополнительной стимуляции. Как результат, увеличивается синтез коллагена и других компонентов ВКМ, благодаря чему происходит ремоделирование микроструктуры дермы, увеличение её толщины, уменьшение количества и глубины морщин.

Сенесценция — это состояние, при котором клетки с накопленными повреждениями ДНК и истощением механизмов её восстановления перестают делиться, теряют способность к ремоделированию и организации ВКМ.

Рис. 2. Кожа после применения аутоДФ: a — через 1 месяц, b — через 3 месяца, c — через 6 месяцев, d — через 12 месяцев. Стрелками указаны группы введённых культивированных аутоДФ. Левая колонка — окраска гематоксилином и эозином, правая колонка — импрегнация нитратом серебра. Ув. ×200. Препараты и микрофотографии Р. В. Деева.

Описание технологии

В специализированной лаборатории Института стволовых клеток человека, соответствующей международным стандартам GMP*, из 4 мм биоптата кожи пациента получают клеточный препарат, содержащий культивированные аутологичные ДФ (аутоДФ). На этапах клеточного процессинга происходит отбор и стимуляция только функционально активных ДФ, которые, несмотря на старение организма, сохраняют высокую способность к делению и синтезу важных для кожи компонентов. Дело в том, что пролиферативный потенциал всей популяции дермальных фибробластов взрослого человека в течение всей его жизни остаётся на довольно высоком уровне — благодаря наличию в фибробластическом диффероне стволовых / прогениторных клеток. Это клетки-предшественницы, которые отвечают за обновление клеточной популяции дермы. Как показали исследования in vitro, первичные культуры, полученные даже от очень пожилых людей (95 лет), содержат до 14 % митотически активных фибробластов.

Рис. 3. Относительное изменение толщины кожи после применения аутоДФ (по результатам гистологических исследований).

Данный факт подтверждается и нашими экспериментами: культуры фибробластов дермы, полученные от пациентов 18–82 лет, характеризуются довольно высокой эффективностью колониеобразования (45.0±9.5 %), независимо от возраста донора. Это даёт возможность из небольшого биоптата кожи любого взрослого человека получить необходимое для проведения терапии количество функционально активных клеток.

После трансплантации культивированных ауто ДФ в дерму их биосинтетическая активность сохраняется. В своей работе мы вводили полученный клеточный материал одновременно и в кожу лица, и в кожу за ушной раковиной, откуда затем проводили забор биоптата для гистологического изучения. Наши исследования показали:

• трансплантированные аутоДФ синтезировали компоненты ВКМ дермы на протяжении как минимум 12 месяцев [Рис. 2];
• трансплантированные аутоДФ присутствовали в дерме небольшими группами, без признаков митотической активности, то есть без признаков деления клеток (следовательно, риск развития каких‑либо гиперпластических процессов при их использовании отсутствует);
• образовались новые коллагеновые волокна;
• толщина дермы увеличилась в среднем на 62,5±13,6 % (р=0,028) в течение первых 12 месяцев после применения аутоДФ [Рис. 3].

Через 24 месяца после применения аутоДФ в дерме также регистрировали отдельные группы фибробластоподобных клеток [Рис. 4], продуцирующих коллагеновые волокна. Однако признаков созревания (утолщения) коллагена не наблюдали, из чего следует, что через два года после трансплантации аутоДФ интенсивность их синтетической активности (по сравнению с таковой в течение первого года после трансплантации) была снижена.

Рис. 4. Кожа пациента М. (54 г.) после применения аутоДФ через 24 месяца. Левая колонка — окраска гематоксилином и эозином, правая колонка — импрегнация нитратом серебра. Ув. ×200. Препараты и микрофотографии Р. В. Деева.

Скорее всего, это связано с уровнем физиологических потребностей дермы (известно, что для обеспечения её физиологического состояния достаточно незначительной функциональной активности фибробластов). По всей видимости, трансплантированные аутоДФ полноценно интегрировались с дермой, стали естественной составляющей её основной клеточной популяции — фибробластического дифферона — и находятся под контролем микроокружения.

Выводы гистологического исследования:

• введенные аутоДФ сохраняют свою жизнеспособность в дерме;
• они располагаются в дерме преимущественно группами;
• их функционирование не приводит к неблагоприятным последствиям, клетки пролиферативно не активны;
• на всех сроках наблюдения в дерме регистрируются признаки увеличения её объёма и процесс синтеза молодых коллагеновых волокон.

Выявленная на гистологическом уровне положительная динамика изменений кожи после применения аутоДФ полностью соответствует клинической картине. Уже через 10–14 дней после окончания курса SPRS-терапии отмечается повышение упругости кожи, уменьшение её рельефности (уменьшение выраженности морщин), улучшение цвета и контуров лица. Эффект имеет нарастающий характер. Так, если через месяц после инъекции на «хорошо» и «отлично» клинический результат оценили 88 % пациентов, то уже через три месяца и позже — 100 %. Врачи-исследователи через месяц определили результат как «хороший» и «отличный» у 86 % пациентов, через три месяца и позже — у 100 % пациентов. Положительные, прогрессирующие со временем (на протяжении как минимум 12 месяцев) изменения состояния кожи подтверждены нами и с помощью инструментальных методов исследования.

Заключение

Инновационная технология — SPRS-терапия, основанная на принципах регенеративной медицины, — позволяет восстанавливать утраченные с возрастом структуру и функции дермы за счёт уникального биологического механизма собственных коллагенобразующих клеток кожи пациента.

SPRS-терапия используется в отечественной эстетической медицине более восьми лет, зафиксировано более 1000 клинических наблюдений пациентов, из которых более 80 % повторно (два и более раз), пролечив одну область кожи, обращались в клиники для лечения этим методом кожи других областей.

Для врачебной практики важно, что SPRS-терапия является не только самостоятельным эффективным методом ремоделирования дермы, но и хорошей базовой основой для применения других косметологических вмешательств, направленных на стимуляцию синтетической активности фибробластов, что позволяет в течение длительного времени поддерживать кожу пациента в хорошем состоянии.

Авторы: Алла Зорина, к. м. н., врач-биохимик, Москва. Вадим Зорин, к. б. н., врач-биофизик, Москва.

Журнал: Облик. Esthetic guide №6(29)

Facebook

LinkedIn